Kit ForeDirect RT-qPCR
Descrizzione
ForeDirect RT-qPCR Kit hè pensatu per l'amplificazione diretta di RNA in tempu reale da cullezzione di tamponi senza prucessi di purificazione di RNA.Stu kit cumpleta i cicli qRT-PCR in una ora.A mistura enzimatica hè una mistura ottimizzata di Reverse Transcriptase, Hot-Start Taq DNA Polymerase, RNase inhibitor.The Reaction Buffer cuntene tutti i cumpunenti nicissarii, cumpresi cumpunenti buffer ottimizzati, Mg2+, dUTP è dNTP.
Specificazioni
100T
Cumpunenti di u kit
Agente di liberazione di l'acidu nucleicu |
Protettore di RNA |
2 × RT-qPCR Buffer |
Miscela di enzimi (Taq & M-MLV) |
Istruzzioni |
Applicazione PCR
1. Una volta i tubi di reazzione PCR sò stati centrifugati brevemente, mette in u tank di mostra di l'instrumentu di amplificazione.
2. Protokollu termale
Passu | Temperature | U tempu | Cicli | |
1 | Trascrizione inversa | 50 ℃ | 15 minuti | 1 |
2 | Pre-denaturazione | 95 ℃ | 1 min | 1 |
3 | Denaturazione | 95 ℃ | 10 seconde | 42 |
4 | Anneal / Extension | 60 ℃ | 30 seconde |
Nota:U signale fluorescente hè statu rilevatu immediatamente dopu à u passu di estensione di ogni ciculu.
3. Dopu à stallà, salvà u schedariu è curriri lu prugrammu riazzioni.
Passi di u funziunamentu
Prima di a preparazione di reagenti, tutti i reagenti in u kit deve esse scongelati à a temperatura di l'ambienti è mischiati delicatamente.
Preparazione di reagenti
1. Preparate l'Acid Nucleic Release Mix
Cumpunente | Volume per Sample o Control |
Agente di liberazione di l'acidu nucleicu | 5 μL |
Protettore di RNA | 0,5 μL |
2. Preparate u Mix Reaction
Cumpunente | Volume per Sample o Control |
2 × RT-qPCR Buffer | 15 μl |
Miscela di enzimi (Taq & M-MLV) | 1,5 μl |
Primer e sonde | 1 μL |
Stoccaggio e vita di conservazione
-U kit deve esse guardatu à -20± 5℃.U periodu di validità hè di 12 mesi.
-Evite i cicli ripetuti di congelazione-scongelu (<5 cicli).