Kit RT-qPCR diretta
Descrizzione di u kit:
◮ Direct RT-qPCR Kit, utilizendu Foreasy Reverse Transcriptase è Foreasy HS Taq DNA Polymerase sviluppatu da Foregene, cù un buffer di reazione unicu, rende stu kit cun forte resistenza è cumpatibilità, è pò pruvà direttamente a reazione utilizendu u sistema Foregene Lysis cum'è mudellu.Stu kit pò dumandà à u kit di rilevazione di l'acidu nucleicu COVID-19 è à u sviluppu di u kit di rilevazione di l'acidu nucleicu di altri batteri patogeni.
Descrizzione
U kit RT-qPCR direttu furnisce un tampone RT-qPCR imballatu separatamente è un enzima altamente efficientemistura (Taq 、 M-MLV 、 RI) ， facendu cunvene per a creazione di kit è sistema di back-endaghjustamentu, in una verificazione simplice.
Specificazioni
500T, 50.000T
Cumpunenti di u kit
| U cuntenutu di u kit (sistema di reazione 20 μL) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Mistura Enzyme Diretta | 500 μl× 1 | 50 ml× 1 |
| 2 × Buffer RT-qPCR direttu | 1 ml× 5 | 500 ml× 1 |
| Istruzzioni | 1 | 1 |
Passi di u funziunamentu
Prima di a preparazione di reagenti, tutti i reagenti in u kit deve esse scongelati à a temperatura di l'ambienti è mischiati delicatamente.
A: Preparate of mudellu è reagente
1. Preparate mudellu RNA preparatu (Si ricumandemu à aduprà Foregene Total RNA Isolation Kit seriale kit à extracte è purificà mudellu RNA) o prodottu cracking campionu (Hè cunsigliatu à aduprà sistema Foregene Lysis), primers specifichi (10 μM) è altri cunsumables pertinente, strumentu.
2. Mettite u 2× RT-qPCR Buffer direttu, RNase-Free ddH2O è 20× ROX Reference Dye (se's necessariu) in a scatula cù u ghjacciu, facendu questi melt naturalmente, è mischjà dolcemente.
B: Preparate of RT-qPCR sistema
Table 1 : Preparate of RT-qPCR ssistema
| Cumpunente | Volume | Concentrazione finale |
| 2 × Buffer RT-qPCR direttu | 10 μl | 1× |
| Mistura Enzyme Diretta | 1μL | |
| Primer primariu (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Amorce inverse (10 μM) | 0,8 μL | 50-900 nM |
| Sonda (4 μM) | 1μL | 200 nM |
| Template (RNA o Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-Freedd H2O | (6,4-X) μL | |
| Volume tutale | 20μL |
C: Set lu RT-qPCR reazione prugramma
Table 2 : RT-qPCR reagìon prugramma paràmetru (per esempiu: due-passu metudu)
| Passu | Temperature | U tempu | Cicli | Cuntinutu | |
| 1 | 50 ℃ | 15 min | 1* | 1 | Trascrizione inversa |
| 2 | 95 ℃ | 1 min | 1 | Pre-denaturazione | |
| 3 | 95 ℃ | 10 sec | 40-45 | Denaturazione | |
| 60 ℃ | 30 sec 2* | Anneal / Extension | |||
Stoccaggio e vita di conservazione
-U kit deve esse guardatu à -20± 5℃.U periodu di validità hè di 12 mesi.
-Evite i cicli ripetuti di congelazione-scongelu (<5 cicli).
