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Descrizzione di Kits

50 Preps, 200 Preps

Stu kit usa a colonna di spine è a formula sviluppata da a nostra cumpagnia, chì ponu estrarre RNA tutale di alta purezza è di alta qualità da diversi tissuti animali cù alta efficienza. Hè furnita una Colonna di purificazione di DNA efficiente, chì pò facilmente separà è adsorbe l'ADN genomicu da u supernatant è u lisatu di tissutu, simplice è risparmiu di tempu;A Colonna solu RNA pò ligà in modu efficace l'RNA è pò esse processatu simultaneamente cù una formula unica Un saccu di campioni.

Tuttu u sistema hè RNase-Free, perchè l'RNA estratti ùn hè micca degradatu;Buffer RW1, Buffer RW2 sistema di lavaggio di buffer, cusì chì l'RNA ottenutu hè liberu di prutezione, DNA, ioni, è contaminazione di composti organici.

Cumpunenti di u kit:

Caratteristiche è vantaghji

■ Ùn ci hè bisognu di preoccupassi di a degradazione di l'RNA;tuttu u sistema hè RNase-Free
■ Caccià effittivamenti DNA-usu DNA-Cleaning Colonna
■ Eliminate l'ADN senza aghjunghje DNase
■ Simply-tutti i funziunamentu sò compie à a temperatura di l'ambienti
■ Fast -operazione pò esse compie in 30 minuti
■ Safe-nessun reattivu organicu necessariu
■ Purità alta -OD260/280≈1.8-2.1

Applicazione di kit

Hè adattatu per l'estrazione è a purificazione di l'RNA tutale da una varietà di tessuti animali freschi o congelati o cellule cultivate.

Parametri di u produttu

■ Applicazioni downstream: sintesi di cDNA di prima fila, RT-PCR, clonazione moleculare, Northern Blot, etc.
■ Campioni : tissuti animali, cellule cultivate
■ Dosage: Tessuti 10-20mg, Cells (2-5) × 10⁶
■ Capacità massima di ubligatoriu di DNA di a colonna di purificazione: 80 μg
■ Volume d'eluzione: 50-200 μl

Flussu di travagliu

Diagramu

Kit d'isolazione di RNA Totale Animal trattatu 20mg
Campioni freschi di mouse, pigliate 5% di RNA totale purificatu 1% agar

Elettroforesi di glycogel
1: Milza 2: Reni
3: Fegatu 4: Cori

Stoccaggio e vita di conservazione

U kit pò esse guardatu per 24 mesi à a temperatura di l'ambienti (15-25 ℃) o 2-8 ℃ per più tempu.U buffer RL1 pò esse almacenatu à 4 ℃ per 1 mese dopu l'aghjunzione di β- mercaptoethanol (opcional). Essendu supportatu da una squadra IT di punta è qualificata, pudemu furnisce un supportu tecnicu in pre-vendita è serviziu post-vendita per Factory Outlets China Techstar Nucleic Acid Extraction Kit Magnetic Bead Based Isolation, DNA Based Isolation, DNA, Virus, Extraction Rapida, DNA, Virus. Test Kit, Accoltamu i clienti novi è vechji di tutti i campi di a vita per cuntattateci per future relazioni cummerciale è successu mutuale!
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L'RNA ùn hè micca estratto o i rendimenti di RNA sò bassi

Ci hè spessu una varietà di fatturi chì affettanu l'efficienza di ricuperazione, cum'è: cuntenutu di RNA di mostra di tissutu, u metudu di funziunamentu, u voluminu di eluzione, etc.

1. Bagnu di ghiaccio o centrifugazione criogenica (4 ° C) hè stata realizata durante l'operazione.

Raccomandazione: Operate à a temperatura di l'ambienti (15-25 ° C) in tuttu u prucessu, ùn fate micca bagnu di ghiaccio è centrifugate à bassa temperatura.

2. Cunservazione di campionu improperu o tempu eccessivu di almacenamentu di mostra.

Raccomandazione: Conservate e mostre à -80 ° C o congelate in nitrogenu liquidu è evite l'usu ripetutu di congelazione-discongelu;pruvate d'utilizà tessuti freschi o cellule cultivate per l'estrazione di RNA.

3. Lisi di mostra insufficiente.

Raccomandazione: Quandu u tessulu homogenizeghja, assicuratevi chì u tissutu hè abbastanza homogenizatu è chì e cellule di tissuti sò abbastanza split per spiegà a liberazione di RNA.

4. L'eluente ùn hè micca aghjuntu bè.

Raccomandazione: Cunfirmà chì RNase-Free ddH₂O hè aghjuntu goccia à u mità di a membrana di a colonna di purificazione.

5. U voluminu currettu di etanol assolutu ùn hè micca aghjuntu à Buffer RL2 o Buffer RW2.

Raccomandazione: Segui l'istruzzioni, aghjunghje u voluminu currettu di etanolu assolutu à Buffer RL2 è Buffer RW2 è mischjà bè prima di utilizà u kit.

6. A dosage di mostra di tissuti ùn hè micca appruvata.

Raccomandazione: Aduprate 10-20 mg di tissutu o (1-5) × 10⁶cellule per 500 μl di tampone RL1, perchè l'uso eccessivo di tessuti può risultare in una ridotta estrazione di RNA.

7. Vulume d'eluzione improperu o eluzione incompleta.

Raccomandazione: U voluminu di l'eluzione di a colonna di purificazione hè 50-200 μl;se l'effettu di l'eluzione ùn hè micca satisfacente, hè cunsigliatu di allargà u tempu di piazzamentu di a temperatura di l'ambienti dopu l'aghjunzione ddH senza RNase preriscaldata.₂O, per esempiu per 5-10 min.

8.A colonna di purificazione hà residu di etanolu dopu à lavà Buffer RW2.

Raccomandazione: Se ci hè residu di etanolu dopu a lavatura di Buffer RW2, centrifugazione di tubu viotu per 1min, u tempu per l'operazione di centrifugazione di tubu viotu pò esse aumentatu à 2min, o a colonna di purificazione pò esse piazzata à a temperatura di l'ambienti per 5 min per sguassà adeguatamente l'etanol residuale.

L'RNA purificatu hè degradatu

A qualità di l'RNA purificatu hè ligata à fatturi cum'è a preservazione di a mostra, a contaminazione di RNase, è a manipulazione, etc.

1. I campioni di tissuti ùn sò micca guardati in u tempu.

Raccomandazione: Se i campioni di tissuti o cellule ùn sò micca usati in una manera puntuale dopu a cullizzioni, criopreserva immediatamente à -80 ° C o nitrogenu liquidu.Per estrattà l'RNA, aduprate una mostra di tissutu o cellula appena pigliata sempre chì hè pussibule.

2. Repeed freeze-thwing of samples tissue.

Raccomandazione: Quandu si guarda i campioni di tissuti, hè megliu tagliate in pezzi chjuchi per a preservazione, è sguassate unu di i pezzi quandu l'utilizanu per evità a congelazione ripetuta di a mostra è a degradazione di l'RNA.

3. RNase hè introduttu o ùn porta guanti dispunibuli, maschere, etc. durante l'operazione.

Raccomandazione: L'esperimenti di estrazione di RNA sò megliu realizati in stanze di manipulazione di RNA separati è a tavola hè sbulicata prima di l'esperimentu.

Purtate guanti è maschere dispunibuli durante l'esperimentu per minimizzà a degradazione di l'RNA causata da l'introduzione di RNase.

4. I reagenti sò contaminati cù RNase durante l'usu.

Raccomandazione: Sustituisci cù un novu Kit di Isolazione di RNA Totale Animal per esperimenti rilativi.

5. I tubi di centrifuga, punte, etc. utilizati in a manipulazione di RNA sò contaminati da RNase.

Raccomandazione: Cunfirmà chì i tubi di centrifuga, punte, pipette, etc. utilizati in l'estrazione di RNA sò tutti RNase-Free.

L'RNA purificatu ottenutu affetta l'esperimenti downstream

RNA purificatu da a colonna di purificazione, se l'ioni sali, u cuntenutu di a proteina hè troppu grande affetterà l'esperimentu downstream, cum'è: trascrizzione inversa,Northern Blot et al.

1. L'RNA elutionatu hà residui di ioni di sali.

Raccomandazione: Confirmate chì u voluminu currettu di etanol hè statu aghjuntu à Buffer RW2 è eseguite 2 lavaggi di colonna di purificazione à a velocità centrifuga indicata per u funziunamentu;s'ellu ci hè un residuu di ioni di sali, lasciate a colonna di purificazione à Buffer RW2 per 5 min à a temperatura di l'ambienti è eseguite a centrifugazione per maximizà a rimuzione di a contaminazione salina.

2. Residu di etanolu in l'RNA eluzione.

Raccomandazione: Confirmate chì dopu a lavatura di u buffer RW2, eseguite l'operazione di centrifugazione di u tubu viotu à a velocità di centrifugazione indicata per l'operazione, aumentate u tempu di l'operazione di centrifugazione di u tubu viotu à 2 min s'ellu ci hè ancu residu di etanolu, o lasciate à a temperatura di l'ambienti per 5 minuti dopu a centrifugazione di u tubu viotu per maximizà a rimozione di ethanol residuu.