Tampone buccale/FTA Card DNA Isolation Kit Estrazione di DNA genomico o Kit di purificazione da tamponi buccali
Descrizzione di u kit:
Purifica rapidamente l'ADN genomicu di alta qualità da campioni di tampone buccale/FTA Card.
◮Nisuna contaminazione da RNase:A Colonna DNA-Only furnita da u kit permette di sguassà l'RNA da l'ADN genomicu senza aghjunghje RNase durante l'esperimentu, impediscendu chì u laboratoriu sia contaminatu da RNase esogenu.
◮Velocità veloce:Foregene Protease hà attività più altu ch'è e proteasi simili, è digerisce i campioni di tissuti rapidamente;l'operazione hè simplice, è l'operazione di estrazione di DNA genomicu pò esse cumpletata in 20-80 minuti.
◮Conveniente:A centrifugazione hè fatta à a temperatura di l'ambienti, è ùn ci hè micca bisognu di centrifugazione à bassa temperatura di 4 ° C o precipitazione di l'etanol di DNA.
◮Sicurezza:Nisuna estrazione di reagenti organici hè necessariu.
◮Alta qualità:L'ADN genomicu estrattu hà frammenti grossi, senza RNA, senza RNase, è un cuntenutu estremamente bassu di ioni, chì ponu risponde à i requisiti di diversi esperimenti.
◮Sistema di microeluzione:Puderà aumentà a cuncentrazione di DNA genomicu, chì hè cunvenutu per a rilevazione o esperimentu downstream.
Descrizzione
Stu kit furnisce un metudu efficiente è rapidu per ottene DNA genomicu d'alta cuncentrazione da tamponi buccali è FTA Card (spots di sangue).Utilizendu a nostra cumpagnia'A colonna è a formula unica di spina di membrana di silice di DNA solu, cumminata cù Foregene Protease, l'ADN genomicu di alta cuncentrazione è di alta qualità pò esse estratti in 80 minuti.La petite colonne de purification spécialement conçue lie l'ADN génomique, et l'ADN peut être élué avec une petite quantité (15μl) sistema di eluzione per aumentà a cuncentrazione di l'ADN genomicu ottenutu, chì hè cunvenutu per a rilevazione o esperimentu downstream.U kit pò processà unu o più campioni à u mumentu, è u prucessu di purificazione ùn hà micca bisognu di l'estrazione di sustanzi organici cum'è fenol, cloroformu, isopropanol o precipitazione di etanolu, è l'operazione hè simplice è risparmiu di tempu.
Specificazioni
50 Prep
Cumpunenti di u kit
| tampon ST1 |
| tampon ST2 |
| Acrilamide lineare |
| Buffer PW |
| Buffer WB |
| Tampon EB |
| Proteasi di u gene anteriore |
| Colonna di DNA solu |
| Istruzzioni |
Caratteristiche è vantaghji
-Nisuna contaminazione da RNase: A Colonna DNA-Only furnita da u kit permette di sguassà l'RNA da l'ADN genomicu senza aghjunghje RNase durante l'esperimentu, evitendu chì u laboratoriu sia contaminatu da RNase esogenu.
- Velocità veloce: Foregene Protease hà attività più altu ch'è proteasi simili, digerisce i campioni rapidamente;operazione simplice.
-Convenient: A centrifugazione hè fatta à a temperatura di l'ambienti, è ùn ci hè micca bisognu di centrifugazione à bassa temperatura di 4 ° C o precipitazione di l'etanol di DNA.
-Sicurezza: Nisuna estrazione di reagenti organici hè necessaria.
-Alta qualità: L'ADN genomicu estratto hà frammenti grossi, senza RNA, senza RNase, è cuntenutu di ioni estremamente bassu, chì ponu risponde à i requisiti di diversi esperimenti.
-Sistema di micro-eluzione: pò aumentà a cuncentrazione di l'ADN genomicu, chì hè cunvenutu per a rilevazione o esperimentu downstream.
Applicazione di kit
Hè adattatu per a purificazione di DNA genomicu da i seguenti campioni: tamponi buccali, FTA Card (macchie di sangue).
Stoccaggio e vita di conservazione
-Stu kit pò esse guardatu per 12 mesi in cundizioni secche à a temperatura di l'ambienti (15-25 ° C);s'ellu deve esse guardatu per un periudu più longu, pò esse guardatu à 2-8 ° C.
Nota: Se almacenatu à bassa temperatura, a suluzione hè propensa à a precipitazione.Prima di l'usu, assicuratevi di mette a suluzione in u kit à a temperatura di l'ambienti per un periudu di tempu.Se necessariu, preheat in un bagnu d'acqua di 37 ° C per 10 minuti per dissolve u precipitatu, è mischjà prima di l'usu.
-Foregene Soluzione Protease hà una formula unica, chì hè attiva quandu si guarda à a temperatura di l'ambienti per un bellu pezzu (3 mesi);a so attività è a stabilità serà megliu quandu si guarda à 4 ° C, per quessa hè cunsigliatu di guardà à 4 ° C, ricordate micca di mantene à -20 ° C.
A colonna di purificazione hè chjucata
In questu kit, in l'operazione di estrazione di DNA genomicu, a colonna di purificazione hè adsorbita direttamente nantu à a mistura di lisi enzimatica di mostra senza passu di centrifugazione, è a colonna di purificazione pò esse bluccata per via di una enzymizazione incompleta è di una viscosità alta di a mostra.
I seguenti causi pussibuli sò i seguenti:
1. Digestione enzimatica incompleta di i campioni di tissuti.
Raccomandazione: U tempu di prucessu di mostra di Foregene Protease pò esse allungatu in modu adattatu o u supernatant pò esse pigliatu dopu a centrifugazione à 12 000 rpm (~ 13 400 × g) per 5 min.
2. Usu eccessivu di campioni di tissuti o grandi tissuti.
Recommendation: Hè megliu micca di più di 1 Buccal swab in a mostra;se a mostra hè troppu grande, aumenta a dosa di Buffer ST1, Foregene Protease, buffer ST2 in cunseguenza.
3. A viscosità di mostra hè troppu altu.
Raccomandazione: I campioni ponu esse diluiti in modu adattatu cù 10 mM di Tris-HCl prima di l'estrazione di DNA genomicu.
4. Frammenti di a carta di sangue sò stati succhiati.
Raccomandazione: U tempu di centrifugazione transitoria di u passu 6 di l'estrazione genomica di spot di sangue (FTA Card) pò esse allungatu in modu adattatu.
Bassu rendiment o senza DNA
Ci hè spessu una varietà di fatturi chì affettanu u rendiment di l'ADN genomicu, cumprese l'urigine di mostra, e cundizioni di almacenamento di mostra, a preparazione di mostra, a manipulazione, etc.
L'ADN genomicu ùn pò esse acquistatu durante l'estrazione
I causi pussibuli sò i seguenti:
1. A preservazione impropria di i campioni o l'almacenamiento per troppu longu porta à a degradazione di l'ADN genomicu.
Raccomandazione: I tamponi orali sò preferibilmente campionati freschi, è ùn hè micca cunsigliatu di utilizà tamponi cunservati per l'operazione di estrazione di DNA genomicu;i campioni di spot di sangue duveranu assicurà chì a qualità hè qualificata è u tempu di almacenamiento ùn deve esse troppu longu.
2. L'usu di tissutu troppu pocu pò esse risultatu in nisuna estrazione di l'ADN genomicu currispundente.
Raccomandazione: Segui l'istruzzioni di campionamentu di tampone buccale in a guida di l'operazione, è sguassate quante volte pussibule per chì abbastanza cellule ponu esse attaccate à u tampone orale per l'estrazione di DNA genomicu;per l'estrazione di campioni di macchie di sangue, l'area di taglio di macchie di sangue pò esse aumentata in modu adattatu.
3. Foregene Protease hè impropriamente cunservatu, risultatu in una diminuzione di a so attività o inattivazione.
Raccomandazione: Cunfirmà e cundizioni di almacenamento di a Proteasi Foregene o rimpiazzà cù una nova Proteasi Foregene per a reazione enzimatica.
4. A preservazione impropria di u kit o u tempu di almacenamento hè troppu longu, risultatu in u fallimentu di certi cumpunenti in u kit.
Raccomandazione: Cumprate un novu kit di isolamentu di DNA di tampone buccale per e prucedure relative.
5. Buffer WB ùn aghjunghje micca etanolu assolutu.
Raccomandazione: Confirmate chì u buffer WB aghjunghje u voluminu currettu di etanolu assolutu.
6. L'eluente ùn hè micca aghjuntu currettamente à a film di silicone.
Raccomandazione: Aghjunghjite 65 ° C gocce d'eluente preriscaldate à u mità di a membrana di silicone è lasciate à a temperatura di l'ambienti per 5 min per aumentà l'efficienza di l'eluzione.
DNA genomicu à pocu rendimentu isolatu
I seguenti causi pussibuli sò i seguenti:
1. A preservazione impropria di i campioni o l'almacenamiento per troppu longu porta à a degradazione di l'ADN genomicu.
Raccomandazione: I tamponi orali sò preferibilmente campionati freschi, è i tamponi cunservati ùn deve micca esse usatu per l'estrazione di DNA genomicu.
2. Se a quantità di mostra di tissutu hè troppu chjuca, u cuntenutu di DNA genomicu extracted serà menu.
Raccomandazione: Segui l'istruzzioni di campionamentu di tampone orale in a guida di u funziunamentu, sguassate quante volte pussibule per chì abbastanza cellule ponu esse attaccate à u tampone orale per l'estrazione di DNA genomicu.
3. Foregene Protease hè impropriamente cunservatu, risultatu in una diminuzione di a so attività o inattivazione.
Raccomandazione: Cunfirmà e cundizioni di almacenamento di a Proteasi Foregene o rimpiazzà cù una nova Proteasi Foregene per a reazione enzimatica.
4. Problemi eluenti.
Raccomandazione: Aduprate Buffer EB per l'eluzione;si usa ddH2O o altri eluenti, cunfirmà chì u pH di l'eluate hè trà 7,0-8,5.
5. L'eluate ùn hè micca aghjuntu currettamente dropwise.
Raccomandazione: Aghjunghjite gocce d'eluente à u mità di a membrana di silicone è lasciate à a temperatura di l'ambienti per 5 min per aumentà l'efficienza di l'eluzione.
6. U liquidu di l'eluzione s'accumula troppu pocu.
Raccomandazione: Aduprate l'eluente per l'eluzione di DNA genomicu cum'è necessariu in l'istruzzioni, almenu micca menu di 15 μl.
Bassa purezza di DNA genomicu isolatu
A bassa purità di DNA genomicu pò purtà à fallimentu o risultati insatisfactori di esperimenti downstream, cum'è: l'enzimi ùn ponu micca esse tagliati, a PCR ùn pò micca ottene u fragmentu di genu d'interessu, etc.
I causi pussibuli sò i seguenti:
1. A contaminazione di l'eteroproteini, a contaminazione di RNA.
Analisi: A colonna di purificazione ùn hè micca lavata cù Buffer PW;a colonna di purificazione di lavaggio Buffer PW ùn hè stata lavata cù a velocità centrifuga curretta.
Raccomandazione: Assicuratevi chì ùn ci hè micca precipitazione in u supernatant prima di aghjunghje l'etanol;assicuratevi di lavà a colonna di purificazione secondu l'istruzzioni, è questu passu ùn pò esse omessi.
2. Contaminazione di ioni impurità.
Analisi: A colonna di purificazione di u lavatu di Buffer WB hè stata omessa o lavata una sola volta, risultatu in una contaminazione ionica residuale.
Raccomandazione: Assicuratevi di lavà Buffer WB 2 volte cum'è diretta per caccià ioni residuali quantu pussibule.
3. Cuntaminazione di l'enzima RNA.
Analisi: RNases stranieri sò stati aghjuntu à u buffer;L'operazione di lavatura di u buffer PW era sbagliata, risultatu in residui di RNasi, affettendu l'operazioni sperimentali di RNA in a valle, cum'è a trascrizione in vitro.
Raccomandazione: I kit d'isolazione di l'acidu nucleicu di a serie Foregene ponu caccià l'RNA senza l'aggiunta di RNasi supplementari, cusì u kit d'isolazione di DNA buccale Swab/FTA Card ùn hà micca bisognu di aghjunghje RNase;assicuratevi di seguità l'istruzzioni per a colonna di purificazione di lavaggio Buffer PW, è questu passu ùn pò esse omessi.
4. Residu di etanolu.
Analisi: Buffer WB ùn hà micca realizatu centrifugazione di tubu vacu dopu à lavà a colonna di purificazione.
Raccomandazione: Eseguite l'operazione curretta di centrifugazione di tubi vioti secondu l'istruzzioni.
5. Altra contaminazione impurità.
Analisi: I campioni salvati o mostri speciali ùn sò micca pretrattati.
Raccomandazione: Pretratte bè a mostra cum'è struitu.
