FAQ perKit d'isolazione di l'ARN totali di l'animali

A seguente analisi di i prublemi chì pudete truvàestrazione di RNA di tissuti animali / cellule will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

L'RNA ùn hè micca estratto o i rendimenti di RNA sò bassi

Ci hè spessu una varietà di fatturi chì affettanu l'efficienza di ricuperazione, cum'è: cuntenutu di RNA di mostra di tissutu, u metudu di funziunamentu, u voluminu di eluzione, etc.

1. Bagnu di ghiaccio o centrifugazione criogenica (4 ° C) hè stata realizata durante l'operazione.

Raccomandazione: Operate à a temperatura di l'ambienti (15-25 ° C) in tuttu u prucessu, ùn fate micca bagnu di ghiaccio è centrifugate à bassa temperatura.

2. Cunservazione di campionu improperu o tempu eccessivu di almacenamentu di mostra.

Raccomandazione: Conservate e mostre à -80 ° C o congelate in nitrogenu liquidu è evite l'usu ripetutu di congelazione-discongelu;pruvate d'utilizà tessuti freschi o cellule cultivate per l'estrazione di RNA.

3. Lisi di mostra insufficiente.

Raccomandazione: Quandu u tessulu homogenizeghja, assicuratevi chì u tissutu hè abbastanza homogenizatu è chì e cellule di tissuti sò abbastanza split per spiegà a liberazione di RNA.

4. L'eluente ùn hè micca aghjuntu bè.

Raccomandazione: Cunfirmà chì RNase-Free ddH₂O hè aghjuntu goccia à u mità di a membrana di a colonna di purificazione.

5. U voluminu currettu di etanol assolutu ùn hè micca aghjuntu à Buffer RL2 o Buffer RW2.

Raccomandazione: Segui l'istruzzioni, aghjunghje u voluminu currettu di etanolu assolutu à Buffer RL2 è Buffer RW2 è mischjà bè prima di utilizà u kit.

6. A dosage di mostra di tissuti ùn hè micca appruvata.

Raccomandazione: Aduprate 10-20 mg di tissutu o (1-5) × 10⁶cellule per 500 μl di tampone RL1, perchè l'uso eccessivo di tessuti può risultare in una ridotta estrazione di RNA.

7. Vulume d'eluzione improperu o eluzione incompleta.

Raccomandazione: U voluminu di l'eluzione di a colonna di purificazione hè 50-200 μl;se l'effettu di l'eluzione ùn hè micca satisfacente, hè cunsigliatu di allargà u tempu di piazzamentu di a temperatura di l'ambienti dopu l'aghjunzione ddH senza RNase preriscaldata.₂O, per esempiu per 5-10 min.

8.A colonna di purificazione hà residu di etanolu dopu à lavà Buffer RW2.

Raccomandazione: Se ci hè residu di etanolu dopu a lavatura di Buffer RW2, centrifugazione di tubu viotu per 1min, u tempu per l'operazione di centrifugazione di tubu viotu pò esse aumentatu à 2min, o a colonna di purificazione pò esse piazzata à a temperatura di l'ambienti per 5 min per sguassà adeguatamente l'etanol residuale.

L'RNA purificatu hè degradatu

A qualità di l'RNA purificatu hè ligata à fatturi cum'è a preservazione di a mostra, a contaminazione di RNase, è a manipulazione, etc.

1. I campioni di tissuti ùn sò micca guardati in u tempu.

Raccomandazione: Se i campioni di tissuti o cellule ùn sò micca usati in una manera puntuale dopu a cullizzioni, criopreserva immediatamente à -80 ° C o nitrogenu liquidu.Per estrattà l'RNA, aduprate una mostra di tissutu o cellula appena pigliata sempre chì hè pussibule.

2. Repeed freeze-thwing of samples tissue.

Raccomandazione: Quandu si guarda i campioni di tissuti, hè megliu tagliate in pezzi chjuchi per a preservazione, è sguassate unu di i pezzi quandu l'utilizanu per evità a congelazione ripetuta di a mostra è a degradazione di l'RNA.

3. RNase hè introduttu o ùn porta guanti dispunibuli, maschere, etc. durante l'operazione.

Raccomandazione: L'esperimenti di estrazione di RNA sò megliu realizati in stanze di manipulazione di RNA separati è a tavola hè sbulicata prima di l'esperimentu.

Purtate guanti è maschere dispunibuli durante l'esperimentu per minimizzà a degradazione di l'RNA causata da l'introduzione di RNase.

4. I reagenti sò contaminati cù RNase durante l'usu.

Raccomandazione: Sustituisci cù un novu Kit di Isolazione di RNA Totale Animal per esperimenti rilativi.

5. I tubi di centrifuga, punte, etc. utilizati in a manipulazione di RNA sò contaminati da RNase.

Raccomandazione: Cunfirmà chì i tubi di centrifuga, punte, pipette, etc. utilizati in l'estrazione di RNA sò tutti RNase-Free.

L'RNA purificatu ottenutu affetta l'esperimenti downstream

RNA purificatu da a colonna di purificazione, se l'ioni sali, u cuntenutu di a proteina hè troppu grande affetterà l'esperimentu downstream, cum'è: trascrizzione inversa,Northern Blot et al.

1. L'RNA elutionatu hà residui di ioni di sali.

Raccomandazione: Confirmate chì u voluminu currettu di etanol hè statu aghjuntu à Buffer RW2 è eseguite 2 lavaggi di colonna di purificazione à a velocità centrifuga indicata per u funziunamentu;s'ellu ci hè un residuu di ioni di sali, lasciate a colonna di purificazione à Buffer RW2 per 5 min à a temperatura di l'ambienti è eseguite a centrifugazione per maximizà a rimuzione di a contaminazione salina.

2. Residu di etanolu in l'RNA eluzione.

Raccomandazione: Confirmate chì dopu a lavatura di u buffer RW2, eseguite l'operazione di centrifugazione di u tubu viotu à a velocità di centrifugazione indicata per l'operazione, aumentate u tempu di l'operazione di centrifugazione di u tubu viotu à 2 min s'ellu ci hè ancu residu di etanolu, o lasciate à a temperatura di l'ambienti per 5 minuti dopu a centrifugazione di u tubu viotu per maximizà a rimozione di ethanol residuu.

Isolamentu di tippi di campioni di l'acidu nulceicu

I kit d'isolazione di RNA di Foregene ponu uttene l'isolamentu / estrazione di RNA tutale da e seguenti fonti di mostra: tessuti animali, piante, cellule, virali, sangue, ecc.

Cumu guardà u kit

Conservazione a temperatura di l'ambienti per 24 mesi.