L'anticorpi, ancu chjamati immunoglobuline (Ig), sò glicoproteini chì si liganu specificamente à l'antigeni.
 
A preparazione di l'anticorpi cunvinziunali hè prodotta da l'immunizazione di l'animali è a cullizzioni di antiserum.Per quessa, l'antiserum cuntene generalmente anticorpi contr'à altri antigens non-related è altri cumpunenti di prutezione in u serum.E molécule d'antigenu generale cuntenenu principalmente epitopi diversi, cusì l'anticorpi cunvinziunali sò ancu una mistura di anticorpi contr'à parechji epitopi diffirenti.Ancu l'anticorpi di serum cunvinziunali diretti contr'à u stessu epitope sò sempre cumposti da anticorpi eterogenei pruduciuti da diversi cloni di cellule B.Dunque, l'anticorpi di serum cunvinziunali sò ancu chjamati anticorpi policlonali, o anticorpi policlonali per cortu.
 
L'anticorpu monoclonale (anticorpu monoclonale) hè un anticorpu altamente uniforme pruduttu da un solu clone di cellula B è diretta solu contr'à un epitope specificu.Hè di solitu preparatu da a tecnulugia di l'ibridoma - a tecnulugia di l'anticorpi di l'ibridoma hè basatu annantu à a tecnulugia di fusione di cellule, cumminendu e cellule B cù a capacità di secretà anticorpi specifichi è cellule di mieloma cù capacità di crescita infinita in hibridomi di cellule B.Questa cellula hibridoma hà e caratteristiche di una cellula parentale.Pò proliferate indefinitu è ​​immortale in vitro cum'è e cellule di mieloma, è pò sintetizà è secrete anticorpi specifichi cum'è limfociti splenic.Per mezu di a clonazione, una linea monoclonale derivata da una sola cellula di hibridoma, vale à dì, una linea di cellula hibridoma, pò esse acquistata.L'anticorpi chì pruduce sò anticorpi assai homogeni contr'à u stessu determinante antigenicu, vale à dì, anticorpi monoclonali.
 
L'anticorpi esistenu cum'è unu o più monomeri in forma di Y (vale à dì, anticorpi monoclonali o anticorpi policlonali).Ogni monomeru in forma di Y hè cumpostu di 4 catene polipeptidiche, cumprese duie catene pesanti identiche è duie catene ligeri identiche.A catena ligera è a catena pisanti sò chjamati secondu u so pesu moleculare.A cima di a struttura in forma di Y hè a regione variabile, chì hè u situ di ubligatoriu di l'antigenu.(Estrattu da Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept)
 
Struttura di l'anticorpi
Catena pesante
Il y a cinq types de chaînes lourdes d'Ig de mammifères, nommées avec les lettres grecques α, δ, ε, γ et μ.L'anticorpi currispondenti sò chjamati IgA, IgD, IgE, IgG è IgM.Diversi catene pesanti sò diffirenti in grandezza è cumpusizioni.α et γ contiennent environ 450 aminoacidi, tandis que μ et ε contiennent environ 550 aminoacidi.
Ogni catena pesante hà duie regioni: a regione constante è a regione variabile.Tutti l'anticorpi di u listessu tipu anu a stessa regione constante, ma ci sò diffirenzii trà anticorpi di diversi tipi.I rigioni custanti di e catene pisanti γ, α è δ sò cumposti da trè duminii Ig in tandem, cù una regione cerniera per aumentà a so flessibilità;le regioni costanti delle catene pesanti μ e ε sono composte da 4 domini Ig.A regione variabile di a catena pesante di l'anticorpu prodotta da e diverse cellule B hè diversa, ma a regione variabile di l'anticorpu prodotta da a stessa cellula B o clone cellula hè a stessa, è a regione variabile di ogni catena pesante hè di circa 110 aminoacidi in lunghezza., È formate un unicu duminiu Ig.
 
Catena ligera
Ci hè solu dui tipi di catene ligeri in i mammiferi: tipu lambda è tipu kappa.Ogni catena ligera hà dui domini ligati: una regione constante è una regione variabile.A durata di a catena ligera hè di circa 211 ~ 217 aminoacidi.E duie catene ligeri cuntenute in ogni anticorpu sò sempre listessi.Per i mammiferi, a catena ligera in ogni anticorpu hà solu un tipu: kappa o lambda.In certi vertebrati inferiori, cum'è i pesci cartilaginosi (pesci di cartilagine) è i pesci ossei, si trovanu ancu altri tipi di catene ligeri, cum'è u tipu iota (iota).
 
Segmenti Fab è Fc
U segmentu Fc pò esse cumminatu direttamente cù enzimi o coloranti fluorescenti per etichettate l'anticorpi.Hè a parte induve l'antibody rivets nantu à a piastra durante u prucessu ELISA, è hè ancu a parte induve u sicondu anticorpu hè ricunnisciutu è ligatu in immunoprecipitation, immunoblotting è immunohistochemistry.L'anticorpi ponu esse idrolizzati in dui segmenti F (ab) è un segmentu Fc da enzimi proteolitichi cum'è a papaina, o ponu esse rotti da a regione cerniera da a pepsina è idrolizzati in un segmentu F (ab) 2 è un segmentu Fc.I frammenti di anticorpi IgG sò à volte assai utili.En raison de l'absence du segment Fc, le segment F(ab) ne précipitera pas avec l'antigène, ni ne sera capturé par les cellules immunitaires dans des études in vivo.A causa di i picculi frammenti molecolari è a mancanza di funzione di cross-linking (per via di a mancanza di segmentu Fc), u segmentu Fab hè generalmente utilizatu per a radiolabeling in studii funzionali, è u segmentu Fc hè principalmente utilizatu com'è agente di bloccu in a tintura istochimica.
 
Regioni variabili è custanti
A regione variabile (regione V) hè situata à 1/5 o 1/4 (cuntenendu circa 118 residui di aminoacidu) di a catena H vicinu à l'N-terminale è 1/2 (cuntenendu circa 108-111 residui di aminoacidu) vicinu à u N-terminale di a catena L.Ogni regione V hà un anellu peptide furmatu da legami disulfuri intra-catena, è ogni anellu peptide cuntene circa 67 à 75 residui aminoacidi.A cumpusizioni è l'arrangementu di l'aminoacidi in a regione V determinanu a specificità di l'antigenu di l'anticorpu.A causa di i tipi sempre cambianti è a sequenza di l'aminoacidi in a regione V, ponu esse furmati parechji tipi d'anticorpi cù diverse specificità di l'antigenu di ubligatoriu.E regioni V di a catena L è a catena H sò chjamate VL è VH, rispettivamente.In VL è VH, a cumpusizioni d'aminoacidi è a sequenza di certi rigioni lucali anu un gradu più altu di variazione.Queste regioni sò chjamate regioni ipervariabili (HVR).A cumpusizioni di l'aminoacidu è l'arrangiamentu di e parti non-HVR in a regione V sò relativamente cunsirvatori, chì hè chjamatu a regione framework.Ci sò trè regioni ipervariabili in VL, generalmente situate à i residui di aminoacidi 24 à 34 è 89 à 97 rispettivamente.I trè HVR di VL è VH sò chjamati HVR1, HVR2 è HVR3, rispettivamente.A ricerca è l'analisi di a diffrazione di cristalli di raghji X hà dimustratu chì a regione ipervariabile hè veramente u locu induve l'antigenu di l'anticorpu si unisce, per quessa hè chjamatu a regione di determinazione di a complementarità (CDR).L'HVR1, HVR2 è HVR3 di VL è VH ponu esse chjamati CDR1, CDR2 è CDR3 rispettivamente.In generale, CDR3 hà un gradu più altu di ipervariabilità.A regione ipervariabile hè ancu u locu principale induve esistinu i determinanti idiotypic di molécule Ig.In a maiò parte di i casi, a catena H ghjoca un rolu più impurtante in u ligame à l'antigenu.
A regione constante (regione C)si trova à 3/4 o 4/5 (circa da l'aminoacidu 119 à u terminal C) di a catena H vicinu à u terminal C è 1/2 (contene circa 105 residui aminoacidu) vicinu à u terminal C di a catena L.Ogni regione funziunale di a catena H cuntene circa 110 residui di aminoacidu, è cuntene un anellu peptide cumpostu da 50-60 residui di aminoacidi cunnessi da ligami disulfuri.A cumpusizioni di l'aminoacidu è l'arrangiamentu di sta regione sò relativamente custanti in a stessa catena di isotipu L di Ig animale è a stessa catena H di tipu.U stessu, pò solu specificamente ligà à l'antigenu currispundenti, ma a struttura di a so regione C hè a stessa, vale à dì, hà a stessa antigenicità.L'anticorpu secundariu IgG di cavallu (o anti-anticorpu) pò esse cumminatu cù i dui A cumminazzioni di anticorpi (IgG) contr'à e diverse exotoxins si trova.Questa hè una basa impurtante per a preparazione di l'anticorpi secundarii è l'applicazione di fluoresceina, isotopi, enzimi è altri anticorpi marcati.
 
 
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