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I metudi di PCR è a contaminazione di l'aerosol di l'acidu nucleicu in i laboratorii di teste di l'acidu nucleicu sò cum'è dui lati di una munita.Pudemu solu sceglie di avè o micca, ma ùn pudemu micca sceglie s'ellu vulemu o spende.

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1. Screening di DNA remover

Per ottene l'eliminazione spaziale di a contaminazione di l'aerosol di l'acidu nucleicu, hè prima necessariu di schermu i removers di DNA chì ponu sguassà l'acidi nucleici in un statu liquidu.Perchè ùn ci sò micca assai removers di DNA chì veramente travaglianu.Per u metudu sperimentale, fate riferimentu à: A rimozione di DNA ùn pò micca esse un "angulu secretu" di u laboratoriu!

In questu esperimentu, 100 copie / μL (CT approssimativamente 31) di plasmide ASFV è di rimozione di DNA quantificati da PCR digitale sò stati mischiati in volumi uguali, è poi reagitu à a temperatura di l'ambienti per 10min, 20min è 30min rispettivamente.Dopu l'estrazione di l'acidu nucleicu, l'amplificazione qPCR hè stata realizata.Un cuntrollu pusitivu mischju cù plasmide è acqua hè statu paragunatu.Siccomu l'esperimentu ùn hè micca finitu à u stessu tempu, pò esse una certa deviazione trà i risultati, ma ùn affetta micca a cunclusione di l'esperimentu.Finu a ora, aghju evaluatu 10 prudutti di rimozione di DNA cummerciale.Solu i prudutti N ° 1, N ° 6 è N ° 8 ponu effittivamenti degradate l'ADN di plasmidi in u statu liquidu.L'altri prudutti ùn anu quasi nisun effettu.

Tabella 1 Effettu di rimuzione di l'acidu nucleicu di l'eliminatore di DNA dispunibule in u cummerciu

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2. L'esperimentu di l'effettu di eliminazione di DNA di disinfettanti cumunimenti usati

1. Screening di disinfettanti cumunimenti usati

Ci sò parechji tippi di disinfettanti cumunimenti usati in i laboratori: aldeidi, fenoli, alcoli, sali d'ammoniu quaternari, perossidi, preparati di cloru è acidi è basi.L'effetti di disinfezzione di sti disinfettanti nantu à i microorganisimi sò stati verificati cumplettamente da esperimenti, ma Ùn ci hè micca abbastanza dati sperimentali nantu à l'effettu di degradazione di l'acidi nucleici.I laboratorii di teste di l'acidu nucleicu anu bisognu di un disinfettante chì ùn solu hà un bonu effettu di disinfezione nantu à i microorganismi, ma pò ancu degradate l'ADN.I risultati di a prova mostranu chì solu dui preparati di cloru di 84 disinfettante è l'acidu trichloroisocyanuric è l'acidu cloridric 1 M rispondenu à i requisiti.Siccomu l'acidu cloridicu 1 M hè assai corrosivu, hè cunsigliatu chì i preparati di cloru sò usati cum'è eliminazione di rifiuti in i laboratorii di teste di l'acidu nucleicu.In ogni casu, i preparati di cloru sò corrosivi per i metalli è ùn ponu micca esse usatu per a disinfezione di strumenti è equipaghji.

Tabella 2 Effetti di eliminazione di DNA di diversi tipi di disinfettanti

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2. A cuncentrazione minima efficace di preparazione di cloru

I disinfettanti basati nantu à u cloru anu un forte effettu di degradazione di l'ADN, ma per via di a so corrosività è di l'irritazione di metalli, ponu esse aduprati per pulizziari u pavimentu, banchetti non metallici, punte di immersione, tubi di centrifuga e altri testi di prova.

Sicondu u "New Coronary Pneumonia Epidemic Disinfection Technical Guidelines": Pollutants (sangue di i pazienti, secrezioni è vomitu) disinfettante chlorine dispunibule 5g/L-10g/L chlorine-containing;pavimenti, mura è superfici di l'ughjettu usanu cloru dispunibule 1g/L Disinfettante di cloru: vestiti, letti è altri tessili sò prima immersi in disinfettante di cloru cù 0,5 g/L di cloru disponibile per 30 minuti, è poi puliti cum'è di solitu.

Table 3 Effettu di eliminazione di DNA di diverse concentrazioni di disinfettante di cloru

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I risultati di a prova mostranu chì: quandu a cuncentrazione di cloru efficace hè più grande o uguale à 1,2 g/L, u disinfettante chì cuntene u cloru pò degrada completamente 100 copies/μL plasmide quandu hè utilizatu per 5 minuti.Quandu agisce per 10 minuti, 84 disinfettante cù una cuncintrazione di cloru efficace più grande o uguale à 0,6 g/L pò degrada completamente 100 copies/μL di plasmidi.

3. Esperimentu di rimuzione di l'aria contaminata da l'aerosol di l'acidu nucleicu

Cumu pulisce l'aria contaminata da l'aerosol di l'acidu nucleicu?A maiò parte di i pinsamenti sò di creà un ambiente contaminatu da l'aerosol è poi pulizziari, o per pulizziari l'acidi nucleici dopu a contaminazione.Per mè, un esperimentu chì ùn pò micca esse ripetutu è i risultati di l'esperimentu ùn ponu esse analizzati quantitativamente ùn hè micca significatu, perchè aghju pigliatu in prestu qualchi metudi di disinfezzione di l'aire disinfettante.Vede "GB27948-2020 Requisiti Generali per i Disinfettanti di l'Aria" è "Specifiche Tecniche di Disinfezione"

1. Test materiali

1.1 Eliminatore di DNA: In questu esperimentu, sò stati scelti dui eliminatori di DNA 6 è 8 in a Tabella 1.

1.2 Test plasmide: In cunsiderà chì u valore CT di a maiò parte di a contaminazione di u laboratoriu serà più altu di 30, a cuncentrazione di u plasmide di u gene ASFV utilizatu sta volta hè di circa 100 copies / μL, è a PCR quantitativa fluorescente CT hè di circa 31,07.Aghjunghjite u plasmide à u bastone di cuttuni floccatu è seccu à l'aria.

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1.3 Strumentu di prova: L'instrumentu di disinfezione Bilingkehan KVBOX, chì hè supportatu da Shenzhen Runlian Environmental Technology Co., Ltd., hà un eccellente rendimentu di disinfezione di l'aria cù disinfettante di perossu d'idrogenu, è pò uccide in modu efficace e spore è altri microorganismi.

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1.4 Spaziu di prova: una finestra di trasferimentu chjusa di circa 0,1 metri cubi.

2. Metudu di prova

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A quantità di disinfettante stabilita nantu à a macchina di disinfettazione hè 10ml, è a cuncentrazione hè 100ml / m3, chì hè assai più altu di "GB27948-2020 Requisiti Generali per i Disinfettanti di l'Aria": quandu si usa a disinfezione spray aerosol, a quantità di disinfettante deve esse ≤10 ml/m3.

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Dopu à spraying, hè stata sigillata per l'ora di 2, è dopu u flocked swab with the plasmid hè eluted with TE, è u flocked swab with the plasmid senza fumigazione hè stata stabilita cum'è cuntrollu.Aduprate u metudu PCR quantitativo di fluorescenza per a rilevazione.

Table 4 I risultati di a prova di rimozione di l'acidu nucleicu di l'aria

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3. Test risultati

Dui tipi di removers di DNA chì ponu degradà in modu efficace i plasmidi in u statu liquidu ùn anu micca effettu in l'esperimentu di rimozione di l'acidu nucleicu di l'aria.Aghju aspittendu à truvà una suluzione chì pò esse usata per caccià a contaminazione di l'aerosol di l'acidu nucleicu in l'aria per risolve cumplettamente u prublema di a contaminazione di l'aerosol di l'acidu nucleicu in i laboratorii di test di l'acidu nucleicu, ma ùn hè statu trovu tali prudutti per u mumentu.Credu chì in u futuru, ci saranu rimozioni di l'acidu nucleicu d'altu rendiment chì ponu esse usatu per a rimozione di l'acidu nucleicu di l'aria.

4. Rinuncia à l'illusioni è fucalizza nantu à a prevenzione

Ùn importa micca quantu imprese vantanu di i so prudutti di rimuzione di l'acidu nucleicu, suggerisce chì a maiò parte di l'amici chì sò impegnati in a prova di l'acidu nucleicu rinunzià à l'illusioni una volta per tutte è ricunnosce a realità: hè assai difficiuli di caccià l'aria contaminata da l'aerosol di l'acidu nucleicu, o piglià una misura preventiva solida è u travagliu di surviglianza di ogni ghjornu!

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Tempu di Postu: Settembre-10-2021