1: Sustituite i pruvisti sperimentali in tempu

Configurate u cuntrollu negativu (NTC) è ripetite parechje volte.Una volta chì si trova chì ci hè una contaminazione di u produttu PCR in u laboratoriu, rimpiazzà tutti i pruvisti sperimentali in u tempu.Cum'è: re-dilute è preparanu i primers, re-sterilize a punta di pipette, tubu EP, ddH2O, etc., rimpiazzà cù una nova pipette, è temporaneamente prestu altri laboratori per fà esperimenti PCR.U laboratoriu contaminatu deve esse ventilatu è irradiatu cù raghji ultraviolet finu à chì a contaminazione di u produttu PCR hè eliminata prima di prucede cù l'esperimentu.

2: Allargà u tempu di esposizione UV

Hè da nutà chì per sguassà a contaminazione di l'ADN, a radiazione ultravioletta regulare deve esse allargata da 2 ore di solitu.Ancu cusì, l'effettu di l'irradiazione UV nantu à l'eliminazione di picculi frammenti (sottu 200bp) di a contaminazione di l'ADN hè ancu micca bonu.

A lunghezza d'onda ultravioletta (nm) hè generalmente 254/300nm, è hè abbastanza per irradià per 30 minuti.Semu devi esse nutatu chì quandu sceglite UV per eliminà a contaminazione di i prudutti di PCR residuali, a durata di u pruduttu PCR è a distribuzione di basi in a sequenza di u produttu deve esse cunsideratu.L'irradiazione UV hè efficace solu per i frammenti longu sopra 500 bp, è hà pocu effettu nantu à i frammenti brevi.

Durante l'irradiazione UV, e basi di pirimidina in u pruduttu PCR formanu dimeri.Questi dimeri ponu finisce l'estensione, ma micca tutti i pirimidini in a catena di DNA ponu formate dimeri, è l'irradiazione UV pò ancu rompe i dimeri..U gradu di furmazione di dimer dipende da a lunghezza d'onda UV, u tipu di dimeru di pirimidina è a sequenza di nucleotidi adiacenti à u situ dimeru.Dunque, se i frammenti amplificati da PCR sò chjuchi, hè cunsigliatu di utilizà u sistema di contaminazione di u produttu UNG anti-PCR.

3: scavengers di contaminazione di DNA cumunimenti usati

L'aerosoli sò facilmente generati quandu i pipette sò aghjuntu, chì hè difficiule di evitari, è si stalla rapidamente.Per quessa, hè senza dubbitu una bona scelta per aduprà spessu i scavengers di contaminazione di DNA speciale per impediscenu a diffusione di a contaminazione di DNA.

4: Aduprate u sistema anti-inquinamentu UNG

Dopu chì a contaminazione di u produttu PCR hè stata eliminata, u laboratoriu di teste pò aduprà u sistema di contaminazione di u produttu anti-PCR UNG per impedisce a contaminazione di u produttu PCR.In i laboratori generali, pudete eseguisce partizioni sperimentali simplici, separà strettamente l'area di produttu PCR da altre aree, stabilisce certu regule è regulamenti di laboratoriu, è cunduce una furmazione pertinente per prevene l'occurrence di contaminazione di u produttu PCR.

Raccomandazioni: Stabbilimentu di un laboratoriu PCR raghjonu, mantene un bon ambiente PCR, furmulà e prucedure operative PCR standard, è cultivà a cuscenza operativa rigorosa di l'esperimenti sò i chjavi per prevene o riduce a contaminazione di l'esperimenti PCR.