Introduzione:

RNA, nome scientificu àcitu ribonucleicu, a so abbreviazione vene da RiboNucleic Acid, hè un tipu d'acidu nucleicu furmatu da cunnetta almenu decine di ribonucleotidi attraversu ligami fosfodiesteri.

A premessa di l'esplorazione di l'RNA hè di estrazione di l'RNA Totale senza contaminazione, è u principiu di basa di l'estrazione di l'RNA pò esse riassuntu cum'è seguitu:

1. Disrupt the cells prima

2. Allora sguassate impurità macromolecular (proteini, lipidi, DNA, etc.)

3. Infine, l'RNA hè precipitatu mentre sguassate i sali è i solventi organici, è purificà ancu l'RNA.

Passatu è presente di u metudu di estrazione

A prima generazione di u metudu di estrazione di RNA hè u metudu di precipitazione TRIzol (i reagenti utilizati includenu guanidine isothiocyanate, phenol, chloroform, etc.) inventatu da un missiavu chjamatu Piotr Chomczynski è nanna Nicoletta Sacchi, perchè sta invenzione permette l'estrazione di RNA Rapidu è faciule, da quandu hà iniziatu a ricerca di RNA.

In seguitu, u Grandpa hà vindutu sta patente à Invitrogen, è Invitrogen hà prumuvutu stu metudu à u mondu è diventa un metudu assai utilizatu.

In seguitu, Invitrogen hè stata acquistata da Thermo!

Pruduttu rapprisintanti: u reattivu TRIzol d'Invitrogen

In ogni casu, u metudu di precipitazione di TRIzol richiede una precipitazione multiple è l'estrazione di RNA, è i reagenti utilizati sò tossichi è piglianu assai tempu per operare.

Dunque, u metudu di purificazione di l'enzimi di colonna di seconda generazione hè ghjuntu, utilizendu a membrana di gel di silice cum'è un materiale specificu di adsorbimentu di l'acidu nucleicu per maximizà a ricuperazione di l'RNA in a mostra mentre sguassate altre impurità.

U metudu di a seconda generazione simplifica l'operazione nantu à a basa di un rendimentu stabile, reduce u fattore di risicu, è migliurà l'efficienza di l'estrazione di RNA.

Prudutti rapprisentanu: QIAGEN RNeasy è a maiò parte di i prudutti domestici

Tuttavia, tramindui i metudi di a prima è a seconda generazione necessitanu l'usu di DNase per sguassà a contaminazione di l'ADN, chì porta qualchì inconveniente à l'esperimenti successivi downstream.A DNase residuale riduce l'efficienza di a trascrizione inversa è riduce a sintesi di cDNA di u primu filu, affettendu cusì l'accuratezza di i risultati.

Dunque, u metudu di estrazione di a terza generazione hè ottimizatu nantu à a basa di a seconda generazione.L'esperimentu ùn hà micca bisognu di aghjunghje l'enzimi, è l'RNA pò esse facilmente acquistatu cù solu duie colonne.

Colonna 1: Colonna di pulizia di DNA per sguassà l'ADN

Colonna 2: A Colonna solu per l'ARN adsorbe è ricupera l'RNA specificamente

Una operazione cusì simplice ùn solu risparmia u tempu, ma facilita ancu l'operazione di esperimenti downstream!

Prudutti rapprisentanti: QIAGEN RNeasy Plus èForegeneI prudutti di a serie di purificazione di RNA

（RNeasy Plus）

（ForegeneKit d'isolazione di RNA totale di a pianta)

Vi dicu in silenziu !U kit RNA di Foregene presenta ancu un RNase Eraser super faciule d'utilizà, chì pò sguassà cumplettamente 400μg di RNase nantu à a superficia solida in 1 minutu, senza aghjunghje sustanzi tossichi à u corpu umanu!

Pic1: Graficu di paragone di u prucessu operativu

I prudutti di Foregene ponu compie l'estrazione di RNA in solu duie canzoni, ùn fate micca ghjilosu l'altri di u vostru prugressu di l'esperimentu!

Pic2:Erisultati sperimentali carta di paragone

A prima generazione (1: TRIzol)

A seconda generazione (2: RNeasy di QIAGEN)

A terza generazione (3: QIAGEN's RNeasy plus, 4: Foregene)

Pic3: Graficu qPCR (graficu di a curva di amplificazione)

A prima generazione (verde significa TRIzol -, rossu significa TRIzol +)

A seconda generazione (blu celu significa QIAGEN RNeasy-, rossu significa QIAGEN RNeasy +)

A terza generazione (blu significa QIAGEN RNeasy plus, verde significa Foregene)

(Nota: qPCR graph "-" indica chì a DNase ùn hè micca aghjuntu è a contaminazione di l'ADN ùn hè micca stata eliminata. Per quessa, u CT hè più altu è u risultatu ùn hè micca precisu; "+" indica chì a DNase hè stata aghjunta è a contaminazione di l'ADN hè stata eliminata, u risultatu hè precisu)

Ogni aghjurnamentu tecnicu significa chì l'operazione di l'esperimentu si sviluppa in una direzzione più simplice è più amichevule.

Foregene hà u scopu di aiutà i più ricercatori scientifichi à risparmià u tempu è u costu sperimentale, ottene risultati sperimentali di alta qualità, è creà inseme risultati di ricerca scientifica più preziosi.