Stabbilisce l'esperimentu PCR SOP per standardizà u cumpurtamentu di u persunale di l'esperimentu.
L'esperimentatore rispetta strettamente e prucedure operative, è minimizza a contaminazione PCR chì pò esse causata da fatturi umani o impedisce l'occurrence di a contaminazione.Inoltre, u sperimentatore deve avè a cunniscenza prufessiunale è e cumpetenze currispundenti, cumprese a cumpetenza in u funziunamentu di l'equipaggiu in relazione, a clarificà tuttu u prucessu di travagliu, u maestru di i metudi di trattamentu di a contaminazione è i metudi di cuntrollu di qualità di u laboratoriu, è esse capaci di interpretà currettamente i risultati di a prova.
Stabbilisce un laboratoriu PCR standard.
U laboratoriu di PCR hè divisu in quattru settori in principiu, vale à dì l'area di preparazione di reagenti, l'area di trasfurmazione di campioni, l'area di amplificazione è l'area di analisi di u produttu di amplificazione.I primi dui zoni sò zoni di pre-amplificazione, è l'ultimi dui zoni sò zoni post-amplificazione.A zona di pre-amplificazione è a zona di post-amplificazione deve esse strettamente separati.Materiali sperimentali, reagenti, carta di registrazione, penne, materiali di pulizia, etc., ponu scorri solu da l'area di pre-amplificazione à l'area di post-amplificazione, vale à dì, da l'area di preparazione di reagenti → zona di trasfurmazione di campioni → zona di amplificazione → zona di analisi di u produttu di amplificazione, è ùn deve micca flussu in daretu.U flussu di l'aria in u laboratoriu deve ancu flussu da l'area di pre-amplificazione à l'area di post-amplificazione, è micca flussu in daretu.U disignu di u laboratoriu PCR ideale hè mostratu quì sottu:
Figura A: Modalità di installazione di laboratori PCR ideale cù pressione negativa in a stanza di buffer
Figura B: Modalità di installazione di laboratori PCR ideale cù pressione positiva in a stanza di buffer
I diagrammi di installazione di u laboratoriu PCR datu in Figura A è Figura B duveranu esse un modu di cunfigurazione più ideale, è u laboratoriu cù e cundizioni ponu riferite à questu modu per u disignu.Per i laboratorii ordinariu, hè cunsigliatu chì l'area di amplificazione PCR è l'area di analisi di u produttu pò esse siparati, è l'apertura di a tappa deve esse ridutta quant'è pussibule in l'area di preparazione di mostra è l'area di amplificazione PCR.Ricurdativi: I prudutti è i pruvisti sperimentali in l'area di analisi di u produttu sò strettamente pruibiti da esse purtati à l'area di preparazione di mostra è l'area di amplificazione PCR.
Se u laboratoriu esegue solu a rilevazione è l'identificazione di PCR, hè cunsigliatu di utilizà a PCR quantitativa fluorescente invece di a PCR convenzionale.
I risultati di rilevazione PCR quantitativa di fluorescenza ponu esse recullati è analizati da i segnali di fluoriscenza, cusì ùn ci hè bisognu di apre u coperchiu per l'elettroforesi dopu a reazione, chì evita a contaminazione di u produttu PCR causata da a fuga di i prudutti di reazione per furmà aerosol.Se aumentate u numeru di aperture di tappi durante u passu di carica di l'elettroforesi di gel, a contaminazione di l'aerosol hè prubabile.Hè cunsigliatu di prumove l'applicazione di a PCR quantitativa è gradualmente rimpiazzà a PCR qualitativa.
U sistema di contaminazione di u produttu UNG anti-PCR hè utilizatu per a reazione PCR.
U sistema usa dUTP invece di dTTP.Dopu à a reazione di PCR, tutti i prudutti PCR (frammenti di DNA) sò incorporati cù dUTP;in a prossima volta di a reazzione PCR, l'enzima UNG aghjuntu à u sistema hè incubata à 37 ° C per 5 minuti prima di PCR, chì pò specificamente degradate tutti i frammenti di DNA chì cuntenenu dUTP, è poi eseguisce a reazione PCR.Questu pò eliminà completamente a contaminazione di l'aerosol causata da i prudutti PCR.L'effettu hè mostratu in a figura sottu:
Nota: Per a serie PCR diretta, pudete sceglie i prudutti di serie di u sistema di contaminazione di i prudutti anti-PCR di Foregene.Suggerenu
Per i laboratorii chì realizanu teste di genotipamentu à grande scala, hè fortemente cunsigliatu di utilizà u sistema di contaminazione di u produttu UNG anti-PCR per a prova di reagenti in più di a custruzzione di laboratori ragionevuli.
Ricordu: L'usu di stu sistema ùn pò micca sguassà a contaminazione di u produttu PCR chì hè digià stata causata.Dunque, u sistema UNG deve esse usatu à l'iniziu di a prova pertinente, è u sistema UNG deve esse usatu per l'amplificazione di PCR, per impediscenu a contaminazione di i prudutti PCR Falsi pusitivi.
Hè cunsigliatu d'utilizà u sistema PCR-UNG direttu di Foregene quandu si facenu teste à grande scala, cum'è:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;
Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;
Kit per PCR diretto di tessuti animali - UNG;
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Questa serie di kit di Foregeneùn pò micca solu realizà a rilevazione di PCR rapidamente è à grande scala, ma ancu prevene è cuntrullà efficacemente a contaminazione di u produttu PCR.
Tempu di post: 19-mar-2021
